荧光素酶探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

荧光素酶探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于荧光素酶基因的快速、高灵敏检测。适用于科研领域的定性及定量分析，线性范围达5个数量级，可有效区分假阴性样本，避免非特异性交叉反应。

产品特点

高灵敏度与特异性：优化设计的引物和探针针对荧光素酶保守区域，避免与其他微生物DNA/RNA交叉反应。

即开即用：用户仅需提供模板DNA/RNA，试剂盒包含预混缓冲液、酶混合物及阳性对照。

双重检测模式：支持绝对定量（标准曲线法）和定性分析（Ct值判读）。

稳定可靠：50次20μL体系反应，批间差异小，重复性好。

包装规格

| 成分 | 规格 |

| 探针法qPCR缓冲液 | 500μL |

| 探针法qPCR酶混合液 | 50μL |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL |

| PCR引物-探针干粉 | 50T |

| PCR阳性对照（10^7拷贝/μL）| 50μL |

操作流程

标准曲线制备（以10^1–10^6拷贝/μL为例）

稀释阳性对照：

标记6管（6–1号），每管加45μL稀释液。

6号管加入5μL阳性对照（10^7拷贝/μL），震荡混匀，得10^6拷贝/μL标准品，依次梯度稀释至10^1拷贝/μL。

注意：操作需在独立区域进行，避免污染。

样本DNA制备

推荐设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。PC为阳性对照1000倍稀释液。

兼容市售DNA提取试剂盒，需避免交叉污染。

qPCR反应体系（20μL）

定量分析：N+9个反应管（N样本 + 2对照 + 6标准曲线 + 1阴性对照）。

程序设置：

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 逆转录 | 50℃ | 10 min |

| 预变性 | 95℃ | 10 min |

| 扩增（40循环）| 95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信号） |

数据分析

定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性：阴性对照Ct≥40；阳性对照Ct≤39且具典型扩增曲线。

保存与运输

短期：-20℃保存；长期：-70℃（≤6个月）。

运输需使用2–8℃冰袋，避免反复冻融。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、加样），使用一次性耗材。

反应液避光保存，避免气泡干扰。

实验后消毒台面（10%次氯酸或75%乙醇）。

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

局限性

结果受样本质量、提取效率及运输条件影响。

基因突变可能导致假阴性；交叉污染易致假阳性。

公司正在出售的产品