近平滑念珠菌探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

近平滑念珠菌探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

用于检测近平滑念珠菌核酸，辅助临床或科研中感染诊断。检测结果需结合其他指标综合分析，不可直接用于临床诊断或治疗。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI系列、Bio-Rad CFX、Roche LightCycler、Eppendorf等）。

检验原理

采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对近平滑念珠菌基因保守区域设计特异性引物及探针。扩增过程中释放荧光信号，通过仪器实时监测荧光强度，实现核酸的定性和定量分析。

试剂组成

| 组分名称 | 规格/数量 |

| 荧光定量PCR反应液 | 500μL/管 |

| 酶混合液 | 50μL/管 |

| 引物-探针干粉 | 50T |

| 阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50μL/管 |

| 阴性对照 | 50μL/管 |

| 说明书 | 1份 |

注意事项：

不同批号组分不可混用；

避免反复冻融（≤7次）；

保存于-20℃±5℃，有效期12个月。

样本要求

样本类型：全血、血清、拭子、组织等。

采集与保存：

短期：-20℃；长期：-70℃（≤6个月）；

运输需使用2~8℃冰袋，禁止反复冻融。

核酸提取：建议采用商业化DNA提取试剂盒。

操作步骤

标准曲线制备（定量检测需6个梯度稀释，10^1~10^6拷贝/μL）。

加样：

反应体系20μL（含模板DNA 5μL）。

PCR扩增程序：

预变性：95℃ 10min；

40循环：95℃ 15s → 60℃ 60s（采集FAM通道信号）。

结果判读

定量分析：通过标准曲线计算样本拷贝数。

定性分析：

Ct≤39：阳性；

Ct≥40：阴性；

39<Ct<40：需复测。

局限性及注意事项

局限性：

基因突变可能导致假阴性；

交叉污染可能导致假阳性。

实验要求：

分区操作（试剂配制、加样、扩增）；

使用无酶耗材，避免气溶胶污染。

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