金钱白花蛇探针法荧光定量PCR试剂盒

金钱白花蛇探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品基本信息

规格：50T（50次20μL体系反应）

保存条件：-20℃避光保存，低温运输，有效期12个月。

用途：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品RNA/DNA模板，无需额外优化引物或探针。

高灵敏度与特异性：引物及探针针对金钱白花蛇高度保守序列设计，避免与其他病毒/生物样本交叉反应。

内置对照：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于区分假阴性结果。

兼容性：适用于多种样本类型（血液、粪便、病灶组织等），与主流核酸提取试剂盒兼容。

双重检测模式：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^2~10^7拷贝/μL）。

实验操作流程

（一）样本准备

DNA/RNA提取：按标准方法提取样本核酸，建议使用带芯枪头避免污染。

阳性对照稀释（标准曲线制备）：

按10倍梯度稀释阳性对照（10^8拷贝/μL）至6个浓度（10^7~10^2拷贝/μL），独立操作以防污染。

（二）试剂配制

每反应体系20μL，需配制N+8管（待测样本+阴性对照+6个阳性梯度）。

避光条件下将预混液分装至qPCR管。

（三）加样与扩增

加入2μL模板（顺序：阴性对照→待测样本→阳性对照）。

离心30秒后上机，扩增程序：95℃预变性2分钟；40个循环（95℃ 15秒→60℃ 60秒，采集荧光信号）。

（四）结果判读

定量分析：以Ct值与阳性对照log浓度绘制标准曲线，计算样本拷贝数。

定性分析：

阳性：Ct值<35，S型扩增曲线；

阴性：Ct值>38或无Ct值；

可疑（35≤Ct≤38）：需复检确认。

注意事项

分区操作：严格分离样本制备、试剂配制及扩增区域，避免交叉污染。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，反应液避光保存，彻底混匀后离心。

安全防护：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面及仪器。

存储要求：组分-20℃保存，避免反复冻融；阳性对照单独存放。

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