中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)

中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测中国仓鼠卵巢细胞（CHO）基因组DNA残留，适用于生物制药质量控制、细胞培养监测等科研领域。产品具有高灵敏性（检测限低至100拷贝/反应）和特异性，可同时支持定性与定量分析，线性范围覆盖5个数量级。

产品组成

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |

注：含阳性对照（无传染性DNA片段），不含内参基因。

操作流程

1. 标准曲线制备

稀释步骤：以10倍梯度稀释阳性对照（10^1–10^6拷贝/μL），需在独立区域操作，避免交叉污染。

标记6管（6–1号），每管加45 μL稀释液，依次加入5 μL上一步稀释液，涡旋混匀后冰上保存。

2. 样本DNA制备

建议设置阴性对照（NC，水）和阳性对照（PC，阳性稀释液）。

兼容多数商业DNA提取试剂盒，需确保样本纯度。

3. qPCR反应体系（20 μL）

定量分析：需设置N+9个反应管（样本、阴性对照、标准曲线）。

循环条件：

逆转录：50℃ 10 min（若需）；

预变性：95℃ 10 min；

40循环：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）。

4. 数据分析

定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性，39–40间需复测。

性能参数

灵敏度：100拷贝/反应。

特异性：不与常见微生物DNA交叉反应。

线性范围：10^1–10^6拷贝/μL。

保存与运输

保存：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输：2–8℃冰袋运输，避免反复冻融。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。

防污染措施：使用带滤芯枪头、专用工作服，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，排除假阳性或假阴性结果。

局限性：结果可能受样本处理、提取效率、运输条件等因素影响，建议结合其他检测方法验证。

声明

本产品仅用于科研，不适用于临床诊断。实验操作需符合实验室生物安全规范。

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