小鼠细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) 新品

小鼠细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于检测小鼠细胞（如NS0骨髓瘤细胞或Mus musculus来源细胞）基因组DNA残留，适用于科研用途，不可用于临床诊断。试剂盒包含优化引物、探针及阳性对照，可实现高灵敏度（检测下限达10^1拷贝/μL）和高特异性，避免与其他微生物DNA交叉反应。

产品规格

检测方法：探针法荧光定量PCR（50次反应，20μL体系）

存储条件：-20℃避光保存

保质期：未开封12个月

主要成分：

探针法qPCR缓冲液（500μL）

qPCR酶混合液（50μL）

荧光PCR专用模板稀释液（1mL）

PCR引物-探针干粉（50T）

阳性对照（10^7拷贝/μL，50μL）

操作步骤

1. 标准曲线制备（10倍梯度稀释）

标记6管，分别加入45μL稀释液，依次用阳性对照稀释至10^6~10^1拷贝/μL，冰上保存。

注意：操作需在独立区域，避免污染。

2. 样品DNA制备

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），使用兼容的核酸纯化方法提取DNA。

3. qPCR反应设置（定量分析）

标记N+9管：N+2样本管、6标准曲线管、1阴性对照管。

反应程序：

50℃ 10min（逆转录）；

95℃ 10min（预变性）；

40循环：95℃ 15sec → 60℃ 60sec（采集FAM信号）。

4. 数据分析

定量：以Ct值与标准曲线log值计算浓度。

定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；39-40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需分区域，避免交叉污染。

质量控制：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39且扩增曲线正常。

样本保存：短期-20℃，长期-70℃（≤6个月）；运输需2-8℃冰袋。

安全规范：实验后使用10%次氯酸或75%酒精消毒台面，废弃物按生物危害处理。

局限性

结果可能受样本质量、提取方法、运输条件影响。

基因突变或试剂保存不当可能导致假阴性/假阳性。

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