阿拉斯加三文鱼细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参) 新品

阿拉斯加三文鱼细胞基因组DNA残留探针法荧光定量PCR试剂盒(不含内参)

商品属性

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR（qPCR）技术开发，专用于检测阿拉斯加三文鱼（Oncorhynchus keta）细胞基因组DNA残留。适用于科研领域，具有高灵敏度、高特异性及宽线性范围（5个数量级），可满足定性与定量分析需求。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度：检测限低至100拷贝/反应，优化引物设计确保信号稳定性。

特异性强：靶向基因组DNA保守序列，避免与其他生物样本交叉反应。

质量控制：提供阳性对照（无传染性DNA片段），便于区分假阴性结果。

兼容性广：适配主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad、LightCycler等）。

组分清单

荧光定量PCR反应预混液（含探针、引物、dNTPs、酶等）

阳性对照（1×10^8拷贝/μL）

DEPC-H2O（阴性对照）

标准曲线稀释液（可选）

操作流程

1. DNA提取

使用兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议设置阴性对照（水）和阳性对照（试剂盒提供）。

2. 标准曲线制备（定量分析需选）

按10倍梯度稀释阳性对照（10^7~10^2拷贝/μL），独立操作避免污染。

标记离心管（1~6号），依次加入稀释液并混匀，冰上保存。

3. 反应体系配制（20μL/反应）

每管加入18μL预混液，分别加入2μL模板（待测样本、阴性对照、阳性对照）。

离心后立即上机。

4. PCR扩增程序

（具体程序需参考仪器说明书，典型条件如下）

预变性：95℃ 2分钟

循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）

结果判读

定量分析：以阳性对照Ct值绘制标准曲线，计算样本拷贝数。

定性分析：

阳性：Ct值<35，S型扩增曲线。

阴性：Ct值>38或无信号。

可疑（35≤Ct≤38）：需复检确认。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免交叉污染。

试剂保存：-20℃避光保存，使用前充分混匀并短暂离心。

防污染措施：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%乙醇清洁台面。

运输与有效期：低温运输，-20℃保存有效期12个月。

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