泽兰探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品基本信息

规格：50次/20μL反应体系

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。阳性对照需单独存放，防止污染。

用途：专用于泽兰（Lycopi）的核酸定性检测，仅限科研使用，不可用于临床诊断。

产品特点

高特异性：针对泽兰保守序列设计探针及引物，无交叉反应。

高灵敏度：检测限达几百拷贝/反应。

便捷性：即开即用，用户仅需提供DNA模板或样本（如组织、血液、粪便等）。

防污染设计：一管式荧光定量PCR，减少操作污染风险。

质量控制：含阳性对照（1×10^8拷贝/μL）和阴性对照，确保结果可靠性。

样本处理与DNA提取

适用样本类型：

组织匀浆：生理盐水捣碎后离心取上清。

血液/血浆：EDTA或肝素抗凝，离心分离后取上清。

粪便：生理盐水悬浮后离心，沉淀重悬于DNA抽提液。

细胞培养物：离心收集后直接裂解。

DNA提取方法：

试剂盒配套DNA抽提液（粗提法）：100℃裂解10分钟，离心取上清。

可选商业化柱提法，提高纯度。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（以10^2–10^7拷贝/μL为例）

按10倍梯度稀释阳性对照，独立操作避免污染。

2. PCR反应体系（以40μL为例）

| 成分 | 体积（μL） |

| PCR MagicMix 3.0 | 20 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA/阳性对照 | 18 |

3. 扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 95℃ | 5 min |

| 35循环（变性） | 95℃ | 30 sec |

| （退火） | 55℃ | 30 sec |

| （延伸） | 72℃ | 40 sec |

| 终延伸 | 72℃ | 7 min |

4. 结果分析

荧光定量PCR：直接读取Ct值，标准曲线定量。

电泳检测：阳性对照需出现551bp条带，阴性无扩增。

注意事项

分区操作：样本处理、PCR配制、扩增需在不同区域进行。

避免污染：使用带滤芯枪头，定期更换手套。

重复验证：若样本未扩增，可稀释后复检以排除抑制剂干扰。

失效判断：阳性对照无信号或阴性对照出现扩增时，实验无效。

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