鲫鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

鲫鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本产品为鲫鱼源性成分探针法荧光定量PCR检测试剂盒，采用实时荧光定量PCR技术，专门用于检测样品中鲫鱼源性成分的存在及定量分析。本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断。

产品特点

即开即用，用户只需提供样品DNA模板

引物和探针针对鲫鱼源性成分特异性设计，灵敏度高

提供阳性对照，便于区分假阴性样品

特异性强，不会与其他物种DNA发生交叉反应

适用于定性和定量检测，定量检测线性范围达5个数量级

本产品可进行50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应

包装规格及成分

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50T |

| 试剂五 | PCR阳性对照(10⁷拷贝/μL) | 50μL |

操作流程

标准曲线样品制备

标记6个离心管，编号6至1

各管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液

在6号管中加入5μL阳性对照(1×10⁷拷贝/μL)，震荡混匀，得到1×10⁶拷贝/μL标准品

依次稀释至1号管，得到6个10倍稀释梯度的标准曲线样品

样品DNA制备

建议设置N+2个提取(N为待测样品数，增加阳性对照和阴性对照)

使用兼容的DNA提取方法纯化样品DNA

qPCR反应设置(20μL体系)

定量分析需设置N+9个反应管(N+2样品管、1阴性对照管、6标准曲线管)

按比例加入缓冲液、酶混合液、引物探针和模板

PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 |

| 预变性 | 95℃ | 10分钟 |

| PCR循环(40次) | 95℃ | 15秒 |

| | 60℃ | 60秒(采集FAM通道信号) |

数据分析

定量分析：以标准品浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算待测样品浓度。

定性分析：

阴性对照Ct≥40

阳性对照Ct≤39且有典型扩增曲线

待测样品Ct≤39判为阳性，≥40判为阴性

储存与运输

储存条件：-20℃保存，有效期12个月

运输条件：2-8℃冰袋运输，避免反复冻融

注意事项

操作需在独立区域进行，防止污染

使用前所有组分应完全融化并混匀

反应液需避光保存

严格分区操作(样品处理、试剂配制、加样)

实验后需对工作台和移液器进行消毒处理

所有废弃物应按生物危害物处理

局限性说明

检测结果可能受以下因素影响：

样品收集、处理及保存条件

交叉污染可能导致假阳性

病原体基因变异可能导致假阴性

不同提取方法效率差异

本产品仅限科研用途，如需确诊请结合其他检测方法。

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