鼠呼肠孤病毒3型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

鼠呼肠孤病毒3型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于鼠呼肠孤病毒3型（Mouse Reovirus Type 3, MRV-3）的核酸定性及定量检测，采用探针法荧光定量RT-PCR技术，具有高灵敏度、高特异性及宽线性范围（5个数量级）的特点。适用于科研用途，不可用于临床诊断。

包装规格

试剂一：探针法qRT-PCR缓冲液（500 μL）

试剂二：探针法qRT-PCR酶混合液（50 μL）

试剂三：荧光PCR专用模板稀释液（1 mL）

试剂四：PCR引物-探针干粉（50次反应）

试剂五：PCR阳性对照（10^7拷贝/μL，50 μL）

操作流程

1. 标准曲线制备

标记6管梯度稀释液（10^1–10^6拷贝/μL），使用带芯枪头逐级稀释阳性对照，每步震荡混匀后冰上保存。

注意：稀释需在独立区域操作，避免交叉污染。

2. 样本核酸提取

推荐使用兼容的RNA提取试剂盒，设置阴性对照（NC）和阳性对照（PC）。

PC制备：阳性对照1000倍稀释后调整体积与样本一致。

3. qRT-PCR反应（20 μL体系）

反应体系：

探针缓冲液、酶混合液、引物-探针、模板RNA/DNA。

循环参数：

逆转录：50℃ 10 min

预变性：95℃ 10 min

PCR扩增（40循环）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）

4. 数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。

定性检测：

阳性：Ct ≤ 39（需典型扩增曲线）

阴性：Ct ≥ 40

临界值（39<Ct<40）需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、PCR扩增需在不同区域进行。

防污染措施：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁工作台。

试剂保存：避光、短暂离心混匀，避免反复冻融。

质量控制：每批次实验需包含阴阳性对照，结果无效需重复。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温泡沫箱加冰密封运输。

声明

本产品仅限科研使用，操作需符合实验室生物安全规范。

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