知母探针法PCR鉴定试剂盒 新品

产品基本信息

规格：50T（50次反应，20μL体系）

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月。

用途：科研用途（不可用于临床诊断）。

试剂盒组成

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 / qRT-PCR缓冲液 | 1 mL / 500 μL |

| 试剂二 | 超纯水 / 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL / 1 mL |

| 试剂三 | 引物-探针混合液 / 干粉 | 100 μL / 50T |

| 试剂四 | 阳性对照（1×10⁷~10⁸拷贝/μL） | 50 μL |

| 说明书 | 使用手册 | 1份 |

产品特点

高特异性：基于保守基因序列设计的引物与探针，避免交叉反应。

高灵敏度：检测限低至1000拷贝/反应，支持定性与定量分析。

操作便捷：一站式试剂盒，含预混液、引物及阳性对照，无需额外配制。

防污染设计：一管式RT-PCR技术（部分型号），减少操作误差。

实验操作流程

1. 标准曲线制备（定量分析适用）

用阳性对照按10倍梯度稀释（10⁶~10¹拷贝/μL），独立分区操作。

标记离心管，依次加入稀释液与模板，涡旋混匀后冰上暂存。

2. 样本DNA提取

建议设置阴性对照（NC）与阳性对照（PC），使用兼容的DNA提取试剂盒。

3. qPCR反应体系（20μL）

程序设置：

逆转录：50℃ 10 min（若含RT步骤）。

预变性：95℃ 10 min。

扩增循环（40次）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信号）。

4. 数据分析

定量：以Ct值与标准曲线计算样本浓度。

定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性，39~40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免交叉污染。

试剂处理：使用前充分融化混匀，短暂离心；反应液避光保存。

污染控制：

使用一次性耗材及专用工作服。

实验后以10%次氯酸或75%酒精清洁台面。

运输与存储：低温避光运输，长期保存需-70℃，避免反复冻融。

局限性说明

检测结果受样本质量、提取方法、运输条件影响。

基因突变或操作污染可能导致假阴性/假阳性结果，需结合其他检测方法验证。

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