鸡毒支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

鸡毒支原体探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

预期用途

鸡毒支原体（MG）是导致鸡慢性呼吸道疾病的主要病原体，可引起呼吸道黏膜炎症、肉鸡胴体品质下降、种鸡产蛋率及孵化率降低等。该病原体可通过空气、种蛋垂直传播，并易继发大肠杆菌或病毒性感染。

本试剂盒适用于检测鸡的鼻腔、气管、气囊组织、泄殖腔拭子、卵黄囊等样本中的MG核酸，辅助诊断感染。

检验原理

采用特异性引物和探针，通过荧光定量PCR技术靶向MG基因保守区，实现核酸的体外扩增与检测。

试剂组成

MG反应液：500μL×2管

酶液：50μL×1管

阳性质控品：50μL×1管

阴性质控品：250μL×1管

注：不同批号组分不可混用。

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃，避光保存，避免反复冻融（≤5次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容ABI7500、Bio-Rad系列、Roche LightCycler、安捷伦MX3000P/3005P、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

样本采集与处理

样本类型：

病死禽：鼻腔、气管、气囊组织或渗出物。

活禽：食管、泄殖腔拭子。

鸡胚：卵黄囊、口咽部样本。

保存与运输：

短期（24h内）：2~8℃保存。

长期：-70℃以下，冻融≤3次。

实验操作步骤

1. 核酸提取

组织样本：研磨后离心取上清（100μL）。

推荐使用配套核酸提取试剂（离心柱法）。

2. 试剂配制

反应体系（20μL/管）：19μL MG反应液 + 1μL酶液。

每10份样本需额外多配1份。

3. PCR扩增

循环参数：

预变性：95℃ 2min（1循环）。

扩增：95℃ 15s → 60℃ 30s（45循环，60℃时收集荧光信号）。

荧光通道：FAM检测，无淬灭通道（ABI仪器勿选ROX）。

结果判读

阳性：Ct值≤40，且扩增曲线呈指数增长。

阴性：Ct值>40或无Ct值。

质控要求：

阴性对照：无扩增曲线。

阳性对照：Ct值≤32。

局限性

结果受样本质量、提取方法、运输条件影响。

基因突变可能导致假阴性；交叉污染可能导致假阳性。

需结合临床症状及其他检测综合判断。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免污染。

使用一次性耗材，实验后消毒台面（10%次氯酸或75%酒精）。

反应液避光保存，避免气泡干扰。

废弃物按生物安全规范处理。

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