榛果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

榛果源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒用于检测样品中的榛果源性成分，采用探针法荧光定量PCR技术，具有高灵敏性和特异性，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒包含优化的引物、探针、阳性对照及反应缓冲体系，支持50次20μL体系的检测。

主要特点

即开即用：用户仅需提供样品DNA模板。

高灵敏性：引物和探针经优化设计，检测限低至10拷贝/μL。

双重检测功能：支持定性和定量分析（线性范围达5个数量级）。

严格质控：提供阳性对照，避免假阴性结果；特异性引物可排除其他微生物DNA干扰。

兼容性：与主流DNA提取试剂盒兼容。

包装清单

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50μL |

操作步骤

标准曲线制备（10倍梯度稀释）

标记6管（6至1号），每管加45μL稀释液。

6号管加入5μL阳性对照（10^7拷贝/μL），震荡混匀，得10^6拷贝/μL标准品。

依次稀释至10^1拷贝/μL，冰上保存备用。

样品DNA制备

建议设置N+2个样本（含阴/阳性对照），使用兼容的DNA提取方法。

qPCR反应体系（20μL）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照管 | 标准曲线管 |

| qPCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 引物-探针 | 3μL | 3μL | 3μL |

| 模板DNA | 5μL | — | — |

| 标准品 | — | — | 5μL |

| 超纯水 | — | 5μL | — |

扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 预变性 | 94℃ | 10 min | 1 |

| 扩增 | 94℃ 15 sec → 60℃ 1 min（采集FAM信号） | 40 |

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样品浓度。

定性检测：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；39-40间需复测。

注意事项

分区操作：样品处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，避免污染。

试剂保存：-20℃避光保存，使用前充分离心混匀。

质控要求：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39且曲线正常。

生物安全：实验后需用10%次氯酸或75%酒精处理工作台。

局限性

结果受样本采集、保存及提取方法影响。

基因突变或试剂运输不当可能导致假阴性/假阳性。

保存与有效期

保存条件：-20℃避光。

有效期：12个月（生产日期见包装标签）。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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