猪瘟兔化弱毒疫苗病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

猪瘟兔化弱毒疫苗病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品特点

高灵敏度与特异性：针对猪瘟兔化弱毒疫苗病毒保守序列设计引物和探针，灵敏度可达1000拷贝/反应，无交叉反应。

操作便捷：

一站式试剂盒（含缓冲液、酶混合液、引物探针、阳性对照等），无需额外配制。

一管式RT-PCR技术，逆转录与扩增在同一反应管中完成，减少污染风险。

质量控制：提供无传染性DNA片段作为阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），支持标准曲线定量分析。

包装成分

| 成分 | 规格 | 说明 |

| 探针法qRT-PCR缓冲液（A） | 500μL（黄盖） | 含反应所需缓冲体系 |

| 酶混合液（B） | 100μL（红盖） | 逆转录酶与Taq酶混合物 |

| 引物混合液（D） | 100μL（白盖） | 特异性引物及探针 |

| 阳性对照（F） | 50μL（黄盖） | 1×10⁸拷贝/μL |

| 荧光PCR模板稀释液（C） | 1mL | 用于标准曲线稀释 |

| 使用手册 | 1份 | 含操作步骤与数据分析方法 |

操作步骤

标准曲线制备：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10²~10⁷拷贝/μL），用于定量分析。

RNA提取：

建议使用配套核酸释放剂或兼容的RNA提取试剂盒。

qRT-PCR反应：

反应体系（20μL）：

缓冲液10μL + 酶混合液2μL + 探针1μL + 引物混合液2μL + 模板RNA 5μL。

反应程序：

逆转录：50℃ 30分钟 → 预变性：94℃ 10分钟 → 40循环（94℃ 15秒，60℃ 1分钟，FAM通道采集信号）。

数据分析

定量分析：通过标准曲线计算样品拷贝数。

定性判定：

阳性：Ct值≤39且有典型扩增曲线；

阴性：Ct值≥40或无扩增。

注意事项

分区操作（样本处理、试剂配制、扩增），避免交叉污染。

使用前充分混匀组分并短暂离心，避光保存反应液。

实验后需用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台。

废弃物按生物安全规范处理。

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