硫嘌呤甲基转移酶探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品基本信息

规格：50次/盒（20 μL反应体系）

适用场景：科研用途（非临床诊断）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输方式：低温泡沫箱加冰密封运输，阳性对照需单独存放。

产品特点

即开即用：用户仅需提供样品核酸模板，预混优化试剂减少操作步骤。

高灵敏度与特异性：引物及探针针对TPMT高度保守区设计，避免与其他RNA交叉反应。

双重检测模式：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10¹–10⁶拷贝/μL）。

内置对照：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于区分假阴性结果。

操作流程

标准曲线制备（10倍梯度稀释）

标记6支离心管（6–1号），每管加入45 μL荧光RT-PCR专用稀释液。

依次将阳性对照（10⁷拷贝/μL）按梯度稀释至10⁶–10¹拷贝/μL，每步更换枪头，震荡混匀后冰上暂存。

样品RNA提取

建议设置N+2个样本（含阳性/阴性对照），使用兼容的RNA提取试剂盒或本公司柱式病毒RNAout纯化。

qRT-PCR反应（20 μL体系）

定量分析：需N+9个反应管（样本、阴性对照、6个标准曲线点）。

加样要求：避免气泡，反应液避光操作，阳性对照最后加入以防污染。

数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。

定性检测：

阳性判定：Ct≤36且扩增曲线典型；阴性判定：Ct≥40。

临界值（36<Ct<40）需复测确认。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行，防止交叉污染。

实验防护：使用一次性耗材、手套及专用工作服，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。

质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照，反应液完全融化混匀后离心使用。

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