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牛传染性胸膜肺炎探针法荧光定量PCR试剂盒

Bovine Contagious Pleuropneumonia Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit
3490 50T 起订
上海 更新日期:2026-03-25

上海博湖生物科技有限公司

VIP1年
联系人:博湖生物
电话:57763112拨打
手机:18930344717 拨打
邮箱:3004987436@qq.com

产品详情:

中文名称:
牛传染性胸膜肺炎探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称:
Bovine Contagious Pleuropneumonia Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit
品牌:
派瑞曼
产地:
国产
保存条件:
-20℃避光保存
产品类别:
PCR试剂盒 荧光定量PCR
检测方法:
PCR
种属反应性:
Bovine
检测类型:
PCR检测
样品类型:
牛血液、胸腔积液、肺组织、淋巴结等样本;饲料、环境样本

产品原理

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本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术。探针5'端标记荧光报告基团,3'端标记荧光淬灭基团并被磷酸化以防止延伸。在PCR扩增过程中,Taq酶的5'核酸外切酶活性切割与靶序列结合的探针,使报告基团与淬灭基团分离,产生荧光信号。通过实时监测荧光强度变化,实现对起始模板的定量分析。

产品名称

牛传染性胸膜肺炎探针法荧光定量PCR试剂盒

英文名称

Bovine Contagious Pleuropneumonia Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit

产品规格

50T

产品分类

荧光定量PCR

检测类型

PCR检测

产品货号

PR4877


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产品特点

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即开即用:用户只需提供样品RNA模板

高灵敏度:优化的引物和探针设计,检测限可达10²拷贝/μL

高特异性:针对牛传染性胸膜肺炎病原体高度保守区设计,无交叉反应

质量控制:提供阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),便于区分假阴性结果

稳定可靠:批间差异小,重复性好

试剂盒组成

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| 成分 | 规格 | 主要功能 |

| 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500μL | 提供反应体系基础环境 |

| 探针法qRT-PCR酶混合液 | 100μL | 包含逆转录酶和热启动Taq酶 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1mL | 用于标准曲线稀释 |

| 特异性引物混合液 | 100μL | 靶向CBPP特异性序列 |

| TaqMan探针 | 50μL | 特异性检测扩增产物 |

| 阳性对照(1×10⁸拷贝/μL) | 50μL | 反应体系质量控制 |

| 产品说明书 | 1份 | 操作指南 |

实验前准备

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自备试剂:无RNase水、RNA提取试剂、RNase抑制剂、离心管(0.2mL PCR管)、带滤芯枪头

仪器设备:荧光定量PCR仪、离心机、涡旋振荡器、冰盒、生物安全柜

分区操作:建议在独立区域进行样品制备、试剂配制和PCR扩增

操作步骤

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标准曲线制备(10²-10⁷拷贝/μL梯度稀释)

标记6个离心管(2-7号)

每管加入45μL模板稀释液

7号管加入5μL阳性对照(1×10⁸拷贝/μL),震荡混匀得10⁷拷贝/μL

依次进行10倍系列稀释至2号管(10²拷贝/μL)

所有稀释样品置于冰上备用

样品RNA制备

使用商业RNA提取试剂盒或Trizol法提取样品RNA

建议设置N+2个提取(N样品+阳性对照+阴性对照)

RNA溶解于无RNase水中,浓度建议50-200ng/μL

qRT-PCR反应体系配制(20μL体系)

| 组分 | 体积(μL) | 终浓度 |

| qRT-PCR缓冲液 | 10 | 1× |

| 酶混合液 | 2 | - |

| 特异性探针 | 1 | 0.2μM |

| 引物混合液 | 2 | 0.4μM |

| 模板RNA | 5 | - |

| 无RNase水 | 补至20μL | - |

PCR扩增程序

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 逆转录 | 50℃ | 30min | 1 |

| 预变性 | 94℃ | 10min | 1 |

| 变性 | 94℃ | 15sec | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃ | 1min | 40 |

| 荧光采集 | 60℃ | - | - |

注:荧光信号在退火/延伸阶段采集(FAM通道)

结果分析

定量分析

以阳性对照log浓度为横坐标,Ct值为纵坐标绘制标准曲线

计算样品RNA浓度:Ct值→log浓度→拷贝数

定性分析

阳性判定:Ct值<35,且有典型扩增曲线

可疑判定:35≤Ct值<40,建议重复检测

阴性判定:Ct值≥40或无扩增

注意事项

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本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断

操作全程需使用无RNase耗材,防止RNA降解

标准品稀释应在独立区域进行,避免污染

反应体系配制建议在冰上进行

不同仪器可能需要优化反应条件

建议设置复孔以提高结果可靠性

质量控制

阴性对照:Ct值应≥40或无扩增

阳性对照:Ct值应在预期范围内

标准曲线:相关系数R²应≥0.98,效率90-110%

技术参数

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检测限:100拷贝/μL

线性范围:10²-10⁷拷贝/μL

批内差异:CV<5%

批间差异:CV<10%

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公司简介

派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)的产品品牌。 派瑞曼pyram?是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商,我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。 客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药、生物技术、化工/石化行业等具商业规模的企业。 派瑞曼pyram?除包括化学、分析化学、生命科学、材料科学和病理科学产品。质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。 公司秉承"专注品质、诚信为本、服务至上、合作共赢"的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

成立日期 (13年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 10-50人
年营业额 ¥ 300万-500万
经营模式 贸易
主营行业 生物化工,细胞培养,分子生物学,细胞生物学

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