甲型流感（禽流感）病毒H7N4亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用探针法荧光定量RT-PCR技术，专用于检测甲型流感病毒H7N4亚型的RNA，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物、探针及对照体系，具备高灵敏度和特异性，可定性或定量分析样本，线性范围达5个数量级。

产品组成

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qRT-PCR酶混合液 | 50-100 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉/混合液 | 50-100 μL |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7-10^8拷贝/μL） | 50 μL |

| 说明书 | 操作手册 | 1份 |

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温（2-8℃）。

操作流程

1. 标准曲线制备（以10^1-10^6拷贝/μL为例）

标记6管，依次加入45 μL稀释液，梯度稀释阳性对照（5 μL/管），涡旋混匀后冰上保存。

2. 样本RNA提取

建议设置阴性/阳性对照（N+2），使用兼容的RNA提取试剂纯化样本。

3. qRT-PCR反应（20 μL体系）

循环参数：

逆转录：50℃ 10 min

预变性：95℃ 10 min

PCR扩增（40循环）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）

4. 数据分析

定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。

定性检测：Ct≤36为阳性，≥40为阴性；36-40需复测。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需独立区域，避免交叉污染。

质量控制：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤36且呈典型扩增曲线。

安全规范：

使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。

所有废弃物按生物危害物处理。

局限性

检测结果受样本采集、运输及保存条件影响；

病毒变异可能导致假阴性；

仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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