人类内源性逆转录病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光定量PCR技术，专用于检测人类内源性逆转录病毒（HERV）的RNA。通过特异性引物和探针设计，实现高灵敏度、高特异性的核酸扩增检测，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。

规格与成分

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | qRT-PCR缓冲液 | 500μL |

| 试剂二 | qRT-PCR酶混合液 | 100μL |

| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | HERV特异性引物混合液 | 100μL |

| 试剂五 | HERV探针 | 50μL |

| 试剂六 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）| 50μL |

| 其他 | 说明书 | 1份 |

注：

自备试剂：样品RNA、无核酸酶离心管/吸头等耗材。

不同批号组分不可混用。

储存与运输

储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输：低温（≤8℃）密封运输，避免反复冻融。

实验步骤

1. 标准曲线制备（6个梯度稀释）

标记离心管（7-2号），每管加45μL稀释液。

7号管加入5μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀得1×10⁷拷贝/μL标准品。

依次稀释至2号管（1×10²拷贝/μL），冰上保存备用。

2. 样品RNA制备

建议设置阳性（PC）和阴性对照（NC）。

使用兼容的RNA提取试剂盒纯化样本，避免DNA污染。

3. qRT-PCR反应（20μL体系）

| 成分 | 样品管 | 阴性对照 | 标准曲线管 |

| qRT-PCR缓冲液 | 10μL | 10μL | 10μL |

| 酶混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 探针 | 1μL | 1μL | 1μL |

| 引物混合液 | 2μL | 2μL | 2μL |

| 模板RNA/标准品/水 | 5μL | 5μL水 | 5μL标准品 |

反应程序：

逆转录：50℃ 30分钟

预变性：94℃ 10分钟

PCR循环（40次）：94℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集FAM信号）

数据分析

定量检测：以标准品log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制曲线，计算样本浓度。

定性检测：阴性对照Ct值≥40方可判读，阳性样本Ct值低于阈值。

注意事项

操作需在独立区域进行，避免交叉污染。

阳性对照为无传染性DNA片段，不可替代活体样本。

试剂解冻后需充分混匀，分装避免反复冻融。

声明

本产品仅限科研使用，不适用于临床诊断。实验需符合生物安全规范。

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