小麦内标准GAG56D基因探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专为检测小麦内标准GAG56D基因设计，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒包含优化的引物探针组合、阳性对照及预混反应体系，具有高灵敏度和特异性，可有效避免交叉污染。

产品组成

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需使用冰袋（2~8℃）。

技术参数

检测类型：定性或定量（线性范围≥5个数量级）。

反应体系：20 μL/次，足够50次反应。

灵敏度：可检测低至10^1拷贝/μL的靶标。

特异性：引物探针针对GAG56D基因保守区域设计，无交叉反应。

操作流程

1. 标准曲线制备（定量分析）

使用阳性对照（10^7拷贝/μL）进行10倍梯度稀释（10^1~10^6拷贝/μL），每步更换枪头，冰上操作。

2. 样品DNA制备

推荐设置阴性/阳性对照（N+2样本）。

兼容多数商业DNA提取试剂盒。

3. qPCR反应设置

程序：

逆转录：50℃ 10 min（若需）。

预变性：95℃ 10 min。

40循环：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）。

4. 数据分析

定量：以Ct值对标准曲线log浓度回归计算样品浓度。

定性：Ct≤39为阳性，≥40为阴性；临界值（39~40）需复测。

注意事项

分区操作：样品处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行。

防污染措施：使用带滤芯枪头，实验后以10%次氯酸或75%乙醇清洁台面。

质量控制：

阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤39且呈典型扩增曲线。

避免反复冻融样本（长期保存需-70℃）。

局限性声明

检测结果可能受样本质量、提取效率、运输条件或病原体变异影响。

用途限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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