肠道病毒D68型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

肠道病毒D68型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品基本信息

规格：50次/盒（20μL体系/次）

有效期：12个月（-15℃以下避光保存）

适用领域：科研用途，非临床诊断。

产品特点

即开即用：仅需提供样品RNA模板，无需额外优化引物或探针。

高灵敏度与特异性：引物及探针针对EV-D68高度保守区设计，避免与其他病毒RNA交叉反应。

双重检测功能：支持定性与定量检测，定量线性范围≥5个数量级。

内控设计：包含阳性质控品（5.59×10⁴拷贝/μL）和阴性质控品，有效区分假阴性。

兼容性：适配ABI、Bio-Rad、LightCycler等主流荧光定量PCR仪。

试剂盒组分

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 扩增液或PCR MagicMix | 50μL/1 mL |

| 试剂二 | 反应液或超纯水 | 950μL/1 mL |

| 试剂三 | 引物混合液 | 100μL |

| 试剂四 | 阳性质控品 | 50μL（1×10⁸拷贝/μL） |

| 试剂五 | 阴性质控品 | 50μL |

| - | 说明书 | 1份 |

操作流程

1. 样本处理

样本类型：组织、全血、粪便等。

组织样本：研磨后离心取上清；

全血样本：分离血清后提取RNA。

RNA提取：推荐使用商品化病毒RNA提取试剂盒，提取后-15℃保存。

2. 试剂配制

按N（样本数+2质控）配制反应体系（20μL/管）：

反应液19μL + 扩增液1μL + 模板RNA 5μL。

3. PCR扩增

程序设置：

| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |

| 逆转录 | 50℃ | 15 min | 1 |

| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |

| 扩增 | 95℃ | 15 sec | 40 |

| 退火/延伸 | 55℃ | 30 sec | 40 |

荧光通道：FAM检测，无淬灭通道。

4. 结果判读

阳性：Ct≤35且呈指数扩增曲线；

可疑：35<Ct≤38，需复测；

阴性：无Ct值或Ct>38。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。

防污染措施：使用带滤芯吸头，实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。

运输与储存：-20℃以下运输，避免反复冻融（≤5次）。

质控要求：阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤30。

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