人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3, GPC3）是一种膜性硫酸乙酰肝素糖蛋白，在细胞生长发育中起重要调控作用，且在不同恶性肿瘤中表达差异显著，是肿瘤发生的重要指标之一。本试剂盒以探针法荧光定量RT-PCR技术为核心，基于GPC3高度保守的基因序列设计引物和探针，可实现对血液、组织等样本中靶标核酸的快速定性与定量检测，适用于肿瘤诊断、疗效监测及相关科研工作。

产品用途

本试剂盒采用探针法荧光定量RT-PCR技术，特异性检测人样本中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）的mRNA表达水平，适用于科研实验，不可用于临床诊断。

试剂盒组成

RT-PCR反应液：包含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs等。

探针混合液：针对GPC3基因的特异性荧光标记探针及引物。

阳性对照：含GPC3靶序列的质粒或标准品。

阴性对照：无核酸酶水或非靶标序列。

其他辅助试剂：如RNase抑制剂、缓冲液等。

操作步骤

RNA提取：使用配套或兼容的RNA提取试剂盒处理样本。

逆转录（RT）：将RNA模板逆转录为cDNA。

荧光定量PCR：

配制反应体系，加入探针混合液及cDNA模板。

按仪器要求设置扩增程序（通常为：95℃预变性，40-45个循环的95℃变性、60℃退火/延伸）。

数据分析：通过标准曲线法或ΔΔCt法计算目标基因表达量。

注意事项

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

样本要求：RNA需完整无降解（A260/A280比值1.8-2.0）。

实验环境：需在无核酸污染区域操作，建议使用UDG酶防污染。

技术参数

检测限：可检测低至10拷贝/μL的靶标。

线性范围：10^1–10^8拷贝/μL。

特异性：仅对人GPC3基因无交叉反应。

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