对虾杆状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

对虾杆状病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

高灵敏度：优化的引物和探针设计，检测限低至10^2拷贝/μL。

特异性强：靶向对虾杆状病毒保守基因区域，无交叉反应。

快速便捷：即开即用，仅需提供样品RNA模板。

质控完善：含阳性对照（非活病毒DNA片段），避免假阴性干扰。

适用范围：科研用途，适用于食品、血液、粪便及病灶样本的病原检测。

试剂盒组成

荧光PCR反应液：含染料法荧光探针、dNTPs、缓冲体系。

酶混合液：热启动Taq DNA聚合酶。

阳性对照：冻干DNA片段（10^8拷贝/μL，需稀释使用）。

阴性对照：无核酸酶水。

说明书：1份。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500

Bio-Rad CFX系列

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler ep realplex

操作步骤

1. 样本处理

核酸提取：推荐使用磁珠法或离心柱法提取RNA，避免降解。

2. 试剂配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积/反应 |

| 反应液 | 18μL |

| 酶液 | 1μL |

| 模板RNA | 1μL |

3. PCR扩增程序

| 步骤 | 温度/时间 | 循环数 |

| 预变性 | 95℃, 3min | 1 |

| 变性 | 95℃, 15s | 40 |

| 退火/延伸 | 60℃, 30s | |

4. 数据分析

阈值设定：以阴性对照荧光信号为基线。

阳性判定：Ct值≤35且扩增曲线呈S型。

注意事项

实验分区操作（试剂配制区、样本处理区、扩增区），避免污染。

阳性对照需独立稀释，防止污染其他组分。

废弃物料需经高压灭菌处理。

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