解脲支原体探针法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专用于解脲支原体（Ureaplasma urealyticum）核酸的定性与定量检测。通过高特异性引物及探针设计，可有效区分假阴性样本，避免与其他微生物DNA的交叉反应，适用于科研用途。

产品组成

| 编号 | 成分 | 规格 |

| 试剂一 | 探针法qPCR缓冲液 | 500 μL |

| 试剂二 | 探针法qPCR酶混合液 | 50 μL |

| 试剂三 | 荧光PCR模板稀释液 | 1 mL |

| 试剂四 | PCR引物-探针干粉 | 50次反应 |

| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7拷贝/μL） | 50 μL |

注：试剂盒提供无传染性DNA片段作为阳性对照，不含活体病原。

技术参数

灵敏度：最低检测限100拷贝/反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。

适用仪器：ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等荧光定量PCR仪。

反应体系：20 μL/次，总次数50次。

操作流程

1. 标准曲线制备

标记6支离心管（6–1号），每管加45 μL模板稀释液。

依次梯度稀释阳性对照（10^7拷贝/μL），获得10^6–10^1拷贝/μL的标准品，冰上暂存。

2. 样本DNA提取

样本数：建议设置N+2管（含阳性/阴性对照）。

方法：兼容市售核酸提取试剂盒，按说明书操作。

3. qPCR反应设置

定量分析：需N+9管（含样本、阴性对照、6个标准曲线点）。

程序参数：

逆转录：50℃ 10 min

预变性：95℃ 10 min

扩增循环（40次）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）

4. 结果分析

定量：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴计算样本浓度。

定性：Ct≤39为阳性，Ct≥40为阴性；39<Ct<40需复测。

保存与运输

短期保存：-20℃（避免反复冻融）。

长期保存：-70℃（≤6个月）。

运输条件：2–8℃冰袋。

注意事项

分区操作（试剂配制、样本处理、扩增），避免交叉污染。

使用带芯枪头、一次性手套及专用工作服。

反应液避光保存，彻底混匀后离心。

实验后消毒台面（10%次氯酸或75%酒精）。

局限性声明

检测结果受样本采集、运输及保存条件影响。

基因突变或提取效率差异可能导致假阴性。

阳性对照泄漏或污染可致假阳性。

结果需结合临床及其他检测综合判断。

注：本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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