黑麦草腥黑粉菌探针法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒专为黑麦草腥黑粉菌（Tilletia controversa）的快速、高灵敏检测设计，采用探针法荧光定量PCR技术，适用于科研领域。试剂盒包含优化的引物、探针及阳性对照，可实现特异性扩增和定量分析，避免与其他病原体交叉反应。

核心特点

即开即用：仅需提供样品RNA模板，操作简便。

高灵敏度与特异性：引物及探针针对高度保守区域设计，避免假阴性。

内置对照：含阳性对照，便于区分污染或检测失效。

适用范围：适用于食品、血液、粪便及病灶部位样本（需按规范预处理）。

操作流程

样本采集与处理

食品样本：参照《食品卫生微生物学检验》标准预培养。

血液样本：采集2mL静脉血至EDTA抗凝管，混匀后立即检测。

其他样本：粪便或病灶渗出物需无菌采集，-70℃保存避免反复冻融（≤3次）。

试剂准备

所有试剂使用前需完全解冻，离心混匀。

阳性对照稀释（独立操作区）：

按10倍梯度稀释（10E2-10E7拷贝/μL），避免污染。

PCR反应

体系配置：按比例混合模板、引物、探针及缓冲液。

扩增程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环），荧光信号采集。

结果分析

通过标准曲线（Ct值-拷贝数对数）定量目标核酸。

Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

注意事项

防污染：实验分区操作，使用带滤芯吸头。

保存：阳性对照分装后-20℃保存，避免反复冻融。

用途限制：仅限科研，不适用于临床诊断。

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