细胞简介：
人外周血巨噬分离自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以长期生存。巨噬细胞（Macrophages）是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。
产品名称 | 人外周血巨噬细胞 | 组织来源 | 外周血 |
英文名称 | Human Peripheral Blood Macrophage Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4667 | 生长特性 | 贴壁 |
产品信息:
产品名称 人外周血巨噬细胞
组织来源 外周血
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 实验室分离的人外周血巨噬采用取外周血、通过密度梯度离心法、差速贴壁、细胞因子诱导法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的人外周血巨噬经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培养基：含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：巨噬细胞样
传代特性：属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群
消化液：（12mM）
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
人外周血巨噬细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤：
1. 细胞复苏
运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。
复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。
2. 细胞传代
传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率：每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液：使用无血清冻存液。
冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品：
小鼠肾上腺皮质细胞 Mouse Adrenal Cortical Cells | 胶体金标记的β淀粉样肽（1-42）单克隆抗体 |
MDA-MB-231+LUC人乳腺癌细胞荧光素酶标记 | 细胞人体鼻病毒（rhinovirus）定性检测试剂盒 |
血液麦芽糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 体液辅酶Q含量比色法定量检测试剂盒 |
细胞EGFR 蛋白表达比色法定量检测试剂盒 | 载玻片细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
糖果阿斯巴塘（aspartame）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | STRN4蛋白抗体 |
植物花粉原生质细胞分离试剂盒 | GTP酶IMAP家族成员8抗体 |
己糖激酶3抗体 | FITC标记人CD48单克隆抗体 |
转录因子E2F-5抗体 | 知母皂苷A168422-00-4 |
组氨酸氨酶HAL抗体 | 连翘酯苷1177581-50-8 |
同源盒蛋白PKNOX1抗体 | 小构树醇AKazinol A |
磷酸甘露糖变位酶1抗体 | 人外周血巨噬细胞1,5-二咖啡酰奎宁酸19870-46-3 |
组织IKKα激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 兔结肠平滑肌细胞 Rabbit Colonic Smooth Muscle Cells |
HIS 标记蛋白Ni－NTA树脂再生试剂盒 | Onda11(no11)细胞 |
产品注意事项：
无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。
消化是关键步骤：
控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子：
基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。
生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。
细胞密度与传代：
最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理：
定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。
