马传染性贫血病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

马传染性贫血病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

产品概述

马传染性贫血病毒（Equine Infectious Anemia Virus, EIAV）是一种逆转录RNA病毒，会引起马传染性贫血病，其特征为间歇性发烧、消瘦、进行性衰弱、贫血、出血和浮肿，无烧期间症状逐渐减轻或暂时消失。本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术开发，可实现马传染性贫血病毒的快速定性检测和精准定量分析，对该病的预防和检疫具有重要作用。

产品特点

即开即用：预混优化引物、探针及反应体系，用户仅需提供样品DNA模板。

高灵敏度与特异性：引物针对EIAV高度保守区设计，避免与其他病原体核酸交叉反应，检测限低至10^2拷贝/μL。

双重质控：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，辅助鉴别假阴性结果。

定量与定性兼容：标准曲线线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL），支持绝对定量分析。

稳定可靠：严格质控生产，批间差异小，适配常见荧光定量PCR仪。

操作步骤

标准曲线制备（示例：10^2–10^7拷贝/μL梯度）

标记6管，分别加入45 μL荧光PCR专用稀释液。

取5 μL阳性对照（10^8拷贝/μL）加入第7管，梯度稀释至第2管（10^3拷贝/μL）。

注：稀释需在独立区域操作，避免气溶胶污染。

反应体系配制（20 μL/反应）

模板DNA：2 μL

预混Master Mix：10 μL

引物探针混合液：2 μL

无核酸酶水：6 μL

PCR程序设置

逆转录：50℃ 15分钟（若检测RNA需此步骤）。

预变性：95℃ 3分钟。

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）。

注意事项

样本要求：建议使用抗凝血或组织样本，提取DNA/RNA时避免降解。

污染防控：分区操作（试剂准备、样本处理、扩增区），使用带滤芯枪头。

结果判读：Ct值≤35且扩增曲线呈“S”形视为阳性；阴性对照应无信号。

局限性：仅限科研用途，不可用于临床诊断或动物疫病防控决策。

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