青蟹双顺反子病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术开发，专用于青蟹双顺反子病毒（Mud Crab Dicistrovirus, MCDV）的定性与定量检测。其核心引物及探针针对病毒保守序列设计，具有高特异性和灵敏度，适用于临床样本、科研及水产养殖病害监测。

产品特点

高特异性：引物与探针经优化设计，避免与其他病原体交叉反应。

灵敏度：检测下限可达几百拷贝/反应（部分优化版本灵敏度达10拷贝以下）。

即开即用：预混反应体系，用户仅需提供病毒RNA/DNA模板。

一管式检测：闭管操作减少污染风险，支持自动化高通量分析。

双重用途：支持绝对定量（标准曲线法）与定性检测。

组分清单

| 编号 | 成分 | 规格/包装量 |

| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（预混酶与dNTPs）|

| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（稀释用） |

| 试剂三 | 引物混合液 | 100 μL（含特异性引物及探针）|

| 试剂四 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL |

| —— | 说明书 | 1份 |

保存条件与有效期

储存温度：-20℃避光保存，避免反复冻融。

有效期：12个月（以包装标注日期为准）。

操作流程

样本处理：提取待检样本总RNA，逆转录为cDNA（若试剂盒未包含逆转录步骤需另行处理）。

阳性对照稀释：按10倍梯度稀释阳性对照（建议范围10²-10⁷拷贝/μL），独立操作避免污染。

反应体系配制：每20 μL反应体系包含：

10 μL PCR MagicMix 3.0

2 μL 引物混合液

2 μL cDNA模板

6 μL 超纯水

PCR程序设置：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40-45次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）

数据分析：通过标准曲线计算病毒拷贝数，或通过Ct值判定阴阳性。

注意事项

污染控制：分区操作（样本处理、PCR配制、扩增区），使用带滤芯枪头。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（超纯水）及阳性对照。

适用范围：仅限科研使用，临床诊断需结合其他检测方法验证。

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