粘质沙雷菌染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

粘质沙雷菌染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，预混优化引物及反应体系。

高灵敏度与特异性：针对粘质沙雷菌保守序列设计引物，检测限低至几百拷贝/反应，无交叉反应。

双重检测功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

内置对照：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL DNA片段），便于区分假阴性。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

试剂盒组成

2×qPCR MagicMix：500μL（含染料、dNTPs、聚合酶等）

荧光PCR专用模板稀释液：1mL

粘质沙雷菌PCR引物混合物：100μL

阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）：50μL

使用手册：1份

自备试剂：DNA模板、10×ROX（依机型需求）。

操作步骤

1. 标准曲线制备（定量分析适用）

标记6管（7~2号），每管加45μL稀释液。

梯度稀释阳性对照：7号管加5μL原液（10⁸拷贝/μL）→ 依次稀释至10⁷~10²拷贝/μL（每步换枪头）。

2. 样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化方法提取样本DNA，建议设置阴/阳性对照各1管。

3. qPCR反应体系（20μL）

按以下比例混合：

2×qPCR MagicMix：10μL

引物混合物：2μL

DNA模板：1μL（50ng~1μg）

ddH₂O：补至20μL

程序设置：

预变性：93℃ 3~5min

扩增循环（30~35次）：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s

终延伸：72℃ 7min

注意事项

标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。

反应体系分装建议在冰上操作，减少酶活性损失。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

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