泰泽隐孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用荧光染料法（SYBR Green I）定量检测泰泽隐孢子虫（Cryptosporidium tyzzeri）DNA，适用于科研及临床样本的快速、高灵敏度检测。染料法通过特异性引物扩增目标序列，SYBR Green嵌入双链DNA后释放荧光信号，结合实时PCR技术实现定量分析。

产品特点

高灵敏度：可检测低至1.5 μg/ml的DNA浓度，线性范围广（1.5–24 μg/ml）。

操作简便：即开即用，用户仅需提供DNA模板。

成本优化：相比探针法，染料法无需合成特异性探针，降低实验成本。

稳定性：-20℃保存，低温运输确保试剂活性。

组分清单

荧光定量PCR预混液（含SYBR Green I、dNTPs、Taq酶）

泰泽隐孢子虫特异性引物

标准品（原倍浓度24 μg/ml）

标准品稀释液

阴性对照

说明书

实验步骤

1. 标准品稀释

按以下梯度稀释标准品（示例）：

5号标准品（24 μg/ml）：150 μl原液 + 150 μl稀释液 → 12 μg/ml（4号）

4号标准品（12 μg/ml）：同上操作 → 6 μg/ml（3号）

依次稀释至1.5 μg/ml（1号标准品）。

2. 加样与扩增

标准孔：加入50 μl梯度标准品。

样品孔：先加40 μl稀释液，再加10 μl待测DNA（终稀释5倍）。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）

3. 数据分析

荧光阈值（Threshold）设定为基线信号（前15循环）的10倍标准差。

通过标准曲线计算样本中目标DNA浓度。

注意事项

避免反复冻融试剂，分装后保存。

加样时避免气泡，确保孔底覆盖。

实验需在洁净环境下操作，防止污染。

技术参数

检测方法：SYBR Green I荧光染料法

规格：50次反应

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

适用仪器：兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。

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