人鼻病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量RT-PCR技术，专为人鼻病毒（Human Rhinovirus, HRV）的检测设计，适用于临床样本或科研中RNA的定性及定量分析。其核心原理是通过特异性引物扩增目标序列，并借助荧光染料实时监测扩增产物，具有高灵敏度和特异性。

试剂盒组分

10×PCR Buffer

dNTP Mix（2mM）

人鼻病毒特异性引物对（需根据保守序列设计）

Taq DNA聚合酶（2U/μL）

阳性对照（含人鼻病毒靶序列）

DEPC-H₂O（无核酸酶水）

实验步骤

1. 样本制备

提取待测样本RNA，建议使用兼容的核酸提取试剂盒。

若需定量检测，需按梯度稀释阳性对照（如1×10⁷~1×10³拷贝/μL）以建立标准曲线。

2. 反应体系配制（冰浴操作）

| 组分 | 体积（μL） |

| 10×PCR Buffer | 5 |

| dNTP Mix（2mM） | 4 |

| 正向引物（10 μM） | 2 |

| 反向引物（10 μM） | 2 |

| Taq酶（2U/μL） | 1 |

| RNA模板 | 1 |

| DEPC-H₂O | 补至50 |

3. PCR扩增程序

预变性：93℃ 3-5分钟

循环阶段（30-35次）：

变性：93℃ 40秒

退火：58℃ 30秒

延伸：72℃ 60秒

最终延伸：72℃ 7分钟

4. 结果分析

通过荧光信号阈值（Ct值）判定样本阳性或阴性。

定量分析需根据标准曲线计算病毒载量。

注意事项

分区操作：样本制备、试剂配制及扩增需在独立区域进行，避免交叉污染。

质量控制：每批次实验需包含阴性对照（无模板对照）及阳性对照。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

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