偷死野田村病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒是一款基于SYBR Green I染料进行荧光定量的RT-PCR检测试剂盒，专为偷死野田村病毒核酸检测设计。采用一步法操作，反转录和qPCR反应在同一反应管内完成，无需反复开盖和移液操作，显著提高检测效率并降低污染风险。

产品组分

2× Advanced SG Buffer

Advanced UH Enzyme Mix（包含耐热逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶）

RNase free H2O

阳性对照（无传染性DNA片段，1×10E8拷贝/μL）

荧光PCR专用模板稀释液

产品特点

高灵敏度：可检测至0.1pg级别的高表达靶标，中等表达靶标可检测至1pg级别

特异性强：引物基于病毒高度保守区设计，不与其它DNA/RNA发生交叉反应

操作简便：即开即用的一步法操作流程

宽线性范围：定量检测线性范围达5个数量级（10E2-10E7拷贝/μL）

全平台兼容：适用于国内外常见荧光定量PCR仪器平台

稳定性好：预混体系可在4℃条件下稳定保存24小时

技术参数

反应体系：20μL

检测次数：50次（20μL体系）

检测类型：支持定性和定量检测

适用样本：病毒RNA

操作方法

标准曲线制备（以10E2-10E7拷贝/μL为例）

标记6个离心管，编号7至2

每管加入45μL荧光PCR专用模板稀释液

7号管中加入5μL阳性对照（1×10E8拷贝/μL），充分震荡1分钟，得到1×10E7拷贝/μL标准品

从7号管取5μL加入6号管，混匀后得到1×10E6拷贝/μL标准品

依次稀释至2号管，完成标准曲线制备

反应程序

反转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 5分钟

PCR扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40个循环）

熔解曲线分析

注意事项

标准品稀释应在独立区域进行，避免污染

使用带滤芯枪头操作

本产品仅限科研使用

阳性对照为无传染性DNA片段，不含活病毒

储存条件

-20℃保存，避免反复冻融。解冻后可在4℃稳定保存24小时。

应用范围

本试剂盒适用于偷死野田村病毒的临床检测、流行病学调查和科学研究。

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