兔痘病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒基于荧光定量PCR技术，专用于兔痘病毒核酸的高灵敏度、高特异性检测。适用于科研领域，可进行定性和定量分析，检测线性范围覆盖5个数量级。

产品组成

反应组分：预混PCR缓冲液、引物、探针（或染料）、dNTPs、DNA聚合酶等。

对照品：阳性对照（无传染性DNA片段，浓度1×10^8拷贝/μL），阴性对照。

辅助试剂：模板稀释液（需自备RNA提取试剂）。

操作步骤

样本准备

提取待测样本RNA，避免降解。

标准曲线制备（定量检测需选做）

将阳性对照按10倍梯度稀释（10^2–10^7拷贝/μL），独立分区操作以防污染。

反应体系配制

按20μL体系配制：加入模板RNA、预混反应液、引物/探针，避光操作。

PCR扩增

按以下程序运行：

逆转录（如适用）：50℃ 10分钟

预变性：95℃ 3分钟

循环阶段（40–45轮）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（采集荧光信号）。

数据分析

通过阈值循环数（Ct值）计算病毒拷贝数，标准曲线需R²≥0.99。

注意事项

分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，防止交叉污染。

质量控制：每批次实验需包含阴/阳性对照，排除假阴性或污染。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融；反应液需短暂离心后使用。

生物安全：实验后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒台面，废弃物按生物危害物处理。

性能参数

灵敏度：最低检测限≤10拷贝/μL。

特异性：引物针对兔痘病毒保守区设计，无交叉反应。

稳定性：有效期12个月，运输需低温。

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