星状诺卡菌染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，专用于快速、高灵敏度检测星状诺卡菌核酸。试剂盒包含预混反应体系（含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl₂、缓冲液及PCR增强剂），用户仅需提供模板DNA和特异性引物即可完成扩增反应。适用于科研、临床样本筛查及环境监测等领域。

产品特点

高灵敏度：检测限低至10³拷贝/mL，适用于低浓度样本。

特异性强：引物针对星状诺卡菌保守序列设计，避免交叉反应。

即开即用：预混优化反应体系，简化操作流程。

稳定性高：-20℃保存6个月，性能稳定。

兼容性强：支持多种样本来源（如组织、体液、环境样本）的DNA提取物。

组分清单

（50次反应，20μL/体系）

| 组分名称 | 规格 |

| 2× qPCR Master Mix | 1 mL |

| 星状诺卡菌引物混合液 | 100 μL |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL |

| DEPC-H₂O | 1 mL |

操作步骤

样本DNA制备

使用商业核酸提取试剂盒或酚-氯仿法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

反应体系配制（20μL体系）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2× qPCR Master Mix | 10 |

| 引物混合液 | 0.8 |

| 模板DNA | 2 |

| DEPC-H₂O | 7.2 |

PCR扩增程序

预变性：95℃, 3分钟；

循环扩增（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃递增，持续5秒/step。

数据分析

阈值设定：以3-15循环的荧光信号基线标准差的10倍为阈值。

Ct值判定：Ct≤35且熔解曲线为单一峰视为阳性。

注意事项

分区操作：建议在样本制备区、PCR反应区分区操作，避免污染。

试剂保存：-20℃避光保存，避免反复冻融。

质量控制：每批实验需包含阴性对照（DEPC-H₂O）和阳性对照。

安全防护：佩戴手套操作，废液按生物危害废弃物处理。

运输与储存

运输条件：低温避光，干冰运输。

储存条件：-20℃保存，有效期6个月。

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