幼禽螺杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

检测原理

采用SYBR Green染料法实时荧光PCR技术：

特异性引物：针对幼禽螺杆菌保守基因区域设计，避免与其他病原体交叉反应。

荧光信号释放：PCR扩增过程中，SYBR Green与双链DNA结合后荧光强度显著增强，通过实时监测荧光信号（Ct值）实现靶标核酸的定量分析。

适用场景：科研检测，适用于幼禽螺杆菌核酸的定性及定量分析。

试剂盒组成

核心组分：

预混扩增液（含SYBR Green染料、dNTPs、缓冲液及优化酶）

幼禽螺杆菌特异性引物对

阳性对照（可选）

自备试剂：DNA模板、10×ROX校正染料（依仪器型号需求）。

产品特点

高特异性：引物经严格验证，与常见肠道菌群无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达几百拷贝/反应，适用于微量样本（如粪便、组织）。

操作便捷：一管式预混体系，减少开盖污染风险。

快速检测：总耗时约1.5–2小时（含核酸提取），远快于传统培养法。

样本要求

适用样本：禽类肠道内容物、粪便、环境拭子等。

处理要求：

样本需在24小时内处理或-80℃保存。

推荐使用柱式或磁珠法DNA提取试剂盒，确保去除PCR抑制剂。

操作步骤

核酸提取：按标准流程提取样本DNA。

反应体系配制：将模板DNA加入预混反应液，离心混匀。

PCR扩增：按以下程序运行：

预变性：95℃ 5分钟

循环阶段：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）

数据分析：通过标准曲线法（需配套标准品）或Ct值比较进行定量。

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期1年。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免气溶胶污染。

定量检测需使用标准品绘制标准曲线（R²≥0.99）。

本产品仅限科研用途，不适用于临床诊断。

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