猪水疱疹病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

猪水疱疹病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

检测原理

基于SYBR Green I染料法实时荧光定量RT-PCR技术。试剂盒通过逆转录（RT）将病毒RNA转化为cDNA，再利用特异性引物对靶基因进行扩增。扩增过程中，SYBR Green I染料与双链DNA结合释放荧光信号，通过实时监测荧光强度实现病毒核酸的定性与定量分析。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒RNA样本，试剂盒包含除模板外的所有反应组分。

高特异性：针对猪水疱疹病毒保守基因区域设计特异性引物，与其他常见猪源病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至几百拷贝/反应，适用于低病毒载量样本。

闭管检测：采用一管式荧光定量RT-PCR体系，避免开盖污染，确保结果可靠性。

高效稳定：50次20μL反应体系，支持高通量检测需求。

适用样本

猪血清、组织匀浆液、鼻腔拭子等含病毒RNA的样本。

操作步骤

RNA提取：使用配套或兼容的RNA提取试剂盒处理样本。

反应体系配制：按说明书比例混合缓冲液、酶、引物及模板RNA。

扩增程序设置：

逆转录：50℃ 15分钟

预变性：95℃ 2分钟

扩增循环（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）

结果分析：根据扩增曲线和Ct值判定样本阴阳性，标准曲线定量病毒载量。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免RNA酶污染。

建议设置阴性对照（无模板）和阳性对照（已知病毒RNA）以确保实验有效性。

扩增结束后需进行熔解曲线分析，验证产物特异性。

储存条件

-20℃避光保存，避免反复冻融。有效期12个月。

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