伯克氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

伯克氏菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对伯克氏菌属高度保守基因序列设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。

试剂盒组成

扩增反应液：含预混PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green染料（950μL/管）。

引物混合液：伯克氏菌属特异性引物（100μL/管）。

阳性质控品：伯克氏菌标准核酸（50μL/管）。

阴性质控品：无核酸酶水（50μL/管）。

模板稀释液：用于样本核酸稀释（1mL/管）。

说明书：1份。

注意：不同批号组分不可混用，试剂盒内组分满足50次检测需求。

储存条件及有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI 7500/StepOnePlus

Roche LightCycler系列

Bio-Rad CFX系列

MX3000P/3005P

Eppendorf Mastercycler ep realplex

自备耗材：无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10μL/200μL/1000μL）、离心机、移液器等。

样本要求

样本类型：胃液分泌物、培养物等（需避免交叉污染）。

保存条件：

短期：-20℃（≤1个月）；

长期：-70℃（≤6个月）。

运输：2~8℃冰袋运输，禁止反复冻融。

操作步骤

样本处理：按规范提取核酸，建议使用商业提取试剂盒。

反应体系配制：

取18μL反应液 + 2μL模板DNA（或阴/阳对照）。

PCR程序：

预变性：95℃ 5分钟；

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，荧光采集）。

数据分析：根据扩增曲线和Ct值判定结果。

性能参数

灵敏度：可检测低至几百拷贝/反应。

特异性：引物针对伯克氏菌属保守序列，无交叉反应。

重复性：批内/批间变异系数≤5%。

注意事项

实验分区操作（样本处理区、PCR扩增区），避免污染。

阳性质控品需单独存放，防止污染其他试剂。

失效或开封后未使用完毕的试剂需标记并弃置。

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