猪乳头瘤病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

猪乳头瘤病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

猪乳头瘤病毒是球形DNA病毒，能引发猪皮肤黏膜鳞状上皮增殖，导致寻常疣、生殖器疣等症状，给养猪业带来经济损失。本试剂盒基于SYBR Green I染料法荧光定量PCR技术开发，可快速、精准检测样本中的病毒，为疾病预防和检疫提供可靠依据，适用于临床诊断、流行病学调查及科研实验等场景。

适用范围：科研用途，适用于猪乳头瘤病毒DNA的定性及定量检测。

产品特点

高灵敏度：优化的引物设计可检测低拷贝数病毒DNA，线性范围覆盖5个数量级（10²~10⁷拷贝/μL）。

特异性强：引物基于病毒高度保守区设计，避免与其他病原体核酸交叉反应。

操作便捷：即开即用，兼容多数核酸纯化方法，用户仅需提供DNA模板。

质量控制：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，便于区分假阴性结果。

操作步骤

标准曲线制备

标记稀释管：标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液。

梯度稀释：

7号管加入5 μL试剂盒提供的阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得到1×10⁷拷贝/μL标准品。

依次换枪头稀释至6号管（1×10⁶拷贝/μL）、5号管（1×10⁵拷贝/μL），直至完成6个梯度稀释。

保存：稀释后标准品需置于冰上备用，避免反复冻融。

样品DNA制备

使用兼容的核酸纯化试剂提取样本DNA，建议浓度调整至20~100 ng/μL。

荧光定量PCR反应

反应体系：20 μL/次，包含预混液、引物及模板DNA。

循环条件：按仪器说明书设置（通常为95℃预变性，40个循环的95℃变性/60℃退火延伸）。

注意事项

分区操作：标准品稀释需在独立区域进行，避免污染。

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

结果判读：定量分析需以标准曲线为基准，Ct值≤35视为阳性。

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