塞内加谷病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

塞内加谷病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

商品属性

预期用途

本试剂盒基于染料法荧光定量RT-PCR技术，用于定性检测塞内加谷病毒（SVV，现亦称塞内卡病毒A型/SVA）RNA。该病毒为小RNA病毒科成员，主要感染猪群，临床表现为蹄部水疱、新生仔猪腹泻及神经症状，死亡率可达15%~30%。本产品适用于兽医诊断、疫情监测及科研实验。

检验原理

RNA提取：通过硅基质膜离心柱法提取样本RNA。

反转录：以RNA为模板，利用反转录酶合成cDNA。

荧光定量PCR：

扩增：Taq DNA聚合酶介导的循环反应（变性-退火-延伸），特异性扩增SVV靶序列。

检测：荧光染料（如SYBR Green）与双链DNA结合，实时监测荧光信号，通过Ct值判定病毒载量。

试剂盒特点

高灵敏度：优化引物探针组合，检测限可达10^2拷贝/μL。

便捷性：预混反应液，即开即用，仅需提供样本RNA。

质控保障：含阳性对照（SVV特异性片段）和阴性对照，避免假阴性/假阳性干扰。

操作步骤

样本处理：采集组织或血清，按规范提取RNA。

反应体系配制：按说明书比例混合试剂、模板及对照。

上机检测：

程序设置：反转录（50℃ 15min）→ 预变性（95℃ 2min）→ 40循环扩增（95℃ 15s，60℃ 30s）。

结果分析：通过扩增曲线及Ct值判定样本阳性/阴性。

注意事项

避免污染：分区操作（样本处理、PCR配制、扩增区分离），使用无核酸酶耗材。

保存条件：反复冻融可能降低试剂活性，建议分装保存。

临床解释：阳性结果需结合临床症状及流行病学综合判断。

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