猪副粘病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

预期用途

本试剂盒用于检测猪副粘病毒（Porcine Paramyxovirus, PMV）的RNA，适用于临床样本、环境样本或科研中的定性及定量分析。该病毒可导致猪群出现呼吸道症状、消瘦及高死亡率（发病率约50%），快速精准检测对疾病防控至关重要。

产品特点

高特异性：针对猪副粘病毒保守基因序列设计的引物，避免与其他病原体交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达10^2拷贝/μL，线性范围覆盖5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

一站式试剂：包含预混引物、酶、缓冲液及阳性对照，无需额外配制。

双重质控：提供无传染性DNA片段作为阳性对照，区分假阴性结果。

试剂盒组分

| 组分名称 | 50次装量 | 备注 |

| RT-PCR预混液 | 1 mL | 含染料、酶、dNTPs等 |

| 引物探针混合液 | 200 μL | 冻干粉，需溶解 |

| 阳性对照 | 50 μL | 无传染性DNA片段 |

| 阴性对照 | 50 μL | DEPC水 |

| RNase-Free水 | 1 mL | 稀释模板用 |

操作步骤

样本处理：提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

反应体系配制（20μL/反应）：

预混液10 μL + 引物探针混合液2 μL + 模板RNA5 μL + RNase-Free水3 μL。

PCR程序设置：

逆转录：50°C 30 min → 预变性：95°C 5 min → 扩增：95°C 15 sec, 60°C 1 min（40循环）。

结果分析：

阈值循环数（Ct值）≤35判为阳性，阴性对照应无扩增曲线。

注意事项

操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。

试剂解冻后需充分混匀，避免反复冻融（≤3次）。

阳性对照仅用于验证体系有效性，不可直接用于临床诊断。

储存条件

-20℃避光保存，有效期12个月；开封后分装保存，避免反复冻融。

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