马尔太虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

马尔太虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对马尔太虫通用基因高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量分析。阳性样本中，PCR扩增释放荧光信号，仪器通过检测信号强度输出结果。

试剂盒组成

| 组分名称 | 规格/数量 |

| 马尔太虫通用扩增液 | 50μL ×1管 |

| 马尔太虫通用反应液 | 950μL ×1管 |

| 阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）| 50μL ×1管 |

| 阴性质控品 | 50μL ×1管 |

| 说明书 | 1份 |

注：不同批号组分不可混用；试剂量满足50次检测。

储存与有效期

储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月（自生产日期起）。

运输：低温（-20℃）运输，需冰袋保护。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX系列）

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler

MX3000P/3005P

自备耗材：无核酸酶离心管（0.2mL/1.5mL）、滤芯吸头（10/200/1000μL）、离心机、移液器等。

样本要求

样本类型：胃液分泌物、呕吐物或培养物（需符合《临床微生物样本采集规范》）。

保存条件：

短期：-20℃（≤1个月）；

长期：-70℃（≤6个月）；

运输：2~8℃冰袋，禁止反复冻融。

操作步骤

1. 样本处理（样本制备区）

DNA提取：使用兼容的核酸提取试剂盒或实验室自选方法纯化样本DNA。

标准曲线制备（阳性对照稀释）：

按梯度稀释阳性质控品（1×10⁸拷贝/μL）至1×10⁷~1×10²拷贝/μL，用于标准曲线建立。

2. PCR反应体系配制（反应设置区）

每20μL反应体系包含：

2×qPCR MagicMix 10μL

引物混合液 2μL

模板DNA 2μL

DEPC-H₂O补足至20μL。

3. 上机检测（扩增区）

按仪器说明书设置程序（推荐：预变性95℃ 3min；40循环×95℃ 15s→60℃ 30s）。

注意事项

分区操作：严格区分样本处理、反应配制及扩增区域，避免交叉污染。

质控要求：每批次检测需包含阴/阳性质控。

结果判读：Ct值≤35且扩增曲线呈S型为阳性；阴性对照无扩增。

产品特点

高特异性：引物针对马尔太虫保守序列设计，无交叉反应。

高灵敏度：检测限低至数百拷贝/反应。

便捷性：即开即用，一管式检测减少污染风险。

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