折光马尔太虫染料法荧光定量PCR试剂盒

折光马尔太虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒专为折光马尔太虫（Marteilia refringens）核酸的荧光定量PCR检测设计，采用染料法（如SYBR Green I）实现高灵敏度、特异性扩增。适用于科研领域（不可用于临床诊断），可检测低至几百拷贝/反应的靶标序列。

产品特点

即开即用：预混2×qPCR反应体系，用户仅需提供DNA模板。

高特异性：针对折光马尔太虫保守序列设计引物，无交叉反应。

灵敏度高：检测下限达数百拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

兼容性：适配主流荧光定量PCR仪，需自备10×ROX校正染料（依机型需求）。

规格与成分

| 成分 | 包装规格 | 保存条件 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管）| -20℃避光 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | -20℃ |

| 折光马尔太虫引物混合物 | 100 μL（白盖） | -20℃ |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | -20℃（避免反复冻融） |

| 使用手册 | 1份 | — |

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

实验流程

标准曲线制备（样本制备区）

标记离心管：编号7至2，分别加入45 μL模板稀释液（DEPC-H₂O）。

梯度稀释：

取5 μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）加入7号管，震荡混匀，得1×10⁷拷贝/μL标准品。

依次稀释至2号管（1×10²拷贝/μL），每次更换枪头。

保存：稀释后标准品置于冰上备用。

PCR反应体系（20 μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合物 | 2 |

| DNA模板 | 2 |

| 模板稀释液/DEPC-H₂O | 补至20 |

扩增程序（以通用参数为例）

预变性：95℃, 3 min

循环（40×）：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集荧光）

熔解曲线分析（可选）：65℃~95℃，每0.5℃递增5 sec。

注意事项

分区操作：标准品稀释与样本处理需在独立区域进行，避免交叉污染。

质量控制：建议每批次实验包含阴性对照（无模板对照）。

仪器校准：部分机型需添加ROX校正染料，具体参考仪器说明书。

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