悉尼马尔太虫染料法荧光定量PCR试剂盒

悉尼马尔太虫染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，针对悉尼马尔太虫基因保守区域设计特异性引物。通过实时监测扩增过程中荧光信号变化，实现对目标核酸的定性和定量分析。

试剂组成

核心组分：

悉尼马尔太虫扩增液（50μL×1管）

悉尼马尔太虫反应液（950μL×1管）

阳性质控品（1×10^8拷贝/μL，50μL×1管）

阴性质控品（50μL×1管）

说明书（1份）

其他可能包含（如生物）：

PCR MagicMix 3.0（1 mL）

引物混合液（100 μL）

超纯水（1 mL）

储存与有效期

储存条件：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括：

ABI系列（如7500、StepOnePlus）

Bio-Rad（CFX系列）

Roche LightCycler

Eppendorf Mastercycler

样本要求

样本类型：胃液分泌物、培养物等，需避免交叉污染。

保存与运输：

短期：-20℃；长期：-70℃（≤6个月）。

运输需使用2~8℃冰袋，禁止反复冻融。

操作步骤

样本处理：按规范提取DNA，确保无RNase/DNase污染。

阳性对照稀释：

按10倍梯度稀释阳性质控品（10^2~10^7拷贝/μL），独立操作避免污染。

PCR反应体系配制：

参考说明书比例混合反应液、模板DNA及对照品。

上机检测：

设置程序：预变性（95℃, 2min）→循环扩增（95℃ 10s, 60℃ 30s, 40 cycles）→熔解曲线分析。

注意事项

不同批号组分不可混用。

实验需分区操作（样本处理、试剂配制、扩增区）。

熔解曲线需单峰，确保扩增特异性。

质量控制

阴性质控品：Ct值≥40或无信号。

阳性质控品：Ct值≤30，且扩增曲线符合预期。

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