细小病毒B19 染料法荧光定量PCR试剂盒

检验原理

本试剂盒基于TaqMan探针法实时荧光PCR技术，针对人细小病毒B19（HPV B19）的特异性核酸序列设计引物及探针，通过荧光信号扩增实现对病原体核酸的体外检测。试剂盒包含内标系统（如SEQ ID NO.7所示），全程监控实验流程，确保结果准确性。

试剂盒组成

PCR反应液：含DNA聚合酶（0.05–0.1 U/μL）、Mg²⁺（1.5–5 mM）、dNTPs（0.1–0.5 mM）及10×PCR缓冲液。

引物与探针：

靶标检测引物：上游（SEQ ID NO.1）、下游（SEQ ID NO.2）；探针（SEQ ID NO.3）。

内标引物与探针：上游（SEQ ID NO.4）、下游（SEQ ID NO.5）；探针（SEQ ID NO.6）。

对照品：阳性对照（含B19病毒核酸）、阴性对照（无靶标核酸）。

辅助试剂：核酸提取试剂（推荐磁珠法或离心柱法）、酶联板（96孔）、标准品（冻干品）、稀释液等。

储存条件与有效期

储存：-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤5次）。

有效期：12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括ABI系列、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad及Eppendorf等。

操作流程

核酸提取：使用配套核酸提取试剂，按说明书操作。

试剂配制：根据样本数（含阴/阳性对照）计算反应体系，每10份样本需额外多配1份。

扩增检测：

加样后运行PCR程序，全程约2小时。

内标监控实验有效性，排除假阴性。

性能特点

高灵敏度与特异性：引物及探针经优化，可精准区分B19病毒。

快速检测：从核酸提取到结果分析仅需约2小时。

安全可靠：符合OIE国际标准，适用于临床及科研场景。

注意事项

不同批号试剂不可混用。

实验需在标准PCR分区操作，避免污染。

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