柯拉松血吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒

检验原理

本试剂盒采用SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对柯拉松血吸虫基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现对目标病原体的定性和定量检测。

试剂组成

柯拉松血吸虫扩增液：50μL×1管

柯拉松血吸虫反应液：950μL×1管

阳性质控品（1×10⁶拷贝/μL）：50μL×1管

阴性质控品：50μL×1管

说明书：1份

注：不同批号组分不可混用，试剂总量满足50次检测需求。

储存条件及有效期

-20℃±5℃避光保存，运输需低温，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。

适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪，包括ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等。

自备耗材

无核酸酶离心管（1.5mL、0.2mL PCR管）

滤芯吸头（10μL、200μL、1000μL）

离心机、振荡器、移液器

样品要求

样本类型：血液、组织或粪便样本，具体采集需参照《寄生虫病检测规范》。

保存与运输：短期保存于-20℃，长期需-70℃；运输使用2~8℃冰袋，避免反复冻融。

实验步骤

标准曲线制备（定量分析需6个梯度稀释阳性质控品，浓度范围1×10⁵~1×10⁰拷贝/μL）。

样本DNA提取：推荐使用兼容性核酸纯化试剂，设置N+2个提取管（含阴阳性对照）。

qPCR反应体系（20μL/反应）：

定量分析：N+9个反应管（含6个标准曲线管、1个阴性对照、N+2个样本）。

定性分析：可简化标准曲线至1个浓度点（如4号管）。

注意事项

严格分区操作（样本处理区、PCR扩增区），避免交叉污染。

阳性对照需单独存放，防止污染其他试剂。

结果判读需结合扩增曲线和熔解曲线分析。

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