鼻血吸虫染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒专为鼻血吸虫核酸的荧光定量PCR检测设计，采用染料法技术，具有高灵敏度和特异性，适用于科研用途（不可用于临床诊断）。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测样本，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：基于鼻血吸虫保守序列设计的引物，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限可达数百拷贝/反应。

闭管检测：一管式操作减少气溶胶污染风险。

标准化包装：50次反应体系（20μL/反应）。

规格与成分

| 成分编号 | 名称 | 规格 | 包装颜色 |

| 2×qPCR MagicMix | 500μL/管 | 棕色管 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 黄盖 |

| 鼻血吸虫PCR引物混合物 | 100μL | 白盖 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50μL | 红盖 |

| — | 使用手册 | 1份 | — |

操作流程

标准曲线制备（可选）

将阳性对照按10倍梯度稀释至1×10⁵拷贝/μL，共6个浓度点。

每个浓度点取5μL加入反应管，震荡混匀后冰上保存。

试剂配制（试剂准备区）

按待检样本数（N）准备N+2个qPCR管（含阴性对照和阳性对照）。

每管加入18μL主混合液（含预混酶、引物、染料）。

模板添加（样本准备区）

分别加入2μL模板：阴性对照（DEPC水）、待测样本、阳性对照。

离心30秒后立即上机。

扩增程序（扩增区）

具体程序参数需参考仪器说明书，典型步骤包括：

预变性：95℃ 2分钟

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

结果分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，推算样本浓度。

定性检测：

阴性：Ct≥40；阳性：Ct≤35；

35<Ct<40需复测，复测Ct<40判为阳性。

注意事项

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

荧光信号采集：染料激发/发射波长为471 nm/530 nm（结合DNA后为500 nm/530 nm）。

实验分区操作，防止污染。

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