幼虫芽胞杆菌（美洲蜂幼虫腐臭病）染料法荧光定量PCR试剂盒

幼虫芽胞杆菌（美洲蜂幼虫腐臭病）染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于检测幼虫芽胞杆菌（Paenibacillus larvae，美洲蜂幼虫腐臭病病原体）。适用于科研用途，具有高灵敏度和特异性，可定性或定量分析样品中的病原体DNA。

产品特点

即开即用：用户仅需提供纯化的DNA模板，试剂盒包含预混优化组分。

高灵敏度与特异性：引物针对幼虫芽胞杆菌保守序列设计，避免交叉反应，检测限可达数百拷贝/反应。

内置对照：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于标准曲线制备及假阴性排查。

宽动态范围：定量检测线性范围覆盖5个数量级。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

规格与成分

包装规格：50次/盒（20μL反应体系）。

主要成分：

2×qPCR预混液（含荧光染料）

幼虫芽胞杆菌特异性引物混合物

荧光PCR专用模板稀释液

阳性对照（非活体DNA片段，1×10^8拷贝/μL）

使用手册

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

操作步骤

标准曲线制备

标记6管（7-2号），每管加45μL模板稀释液。

梯度稀释阳性对照：

7号管加5μL原液（1×10^8拷贝/μL），震荡后得1×10^7拷贝/μL标准品。

依次稀释至2号管（1×10^2拷贝/μL），每步更换枪头。

样品DNA制备

自备方法纯化样品DNA，建议设置阴/阳性提取对照（N+2个样本）。

qPCR反应设置

反应体系（20μL）：

10μL 2×预混液

2μL引物混合物

3μL模板DNA

5μL无核酸酶水（或ROX参比染料，依机型需求）。

程序设置：

预变性：95℃ 5分钟

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 1分钟（40循环，采集荧光信号）。

注意事项

标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。

本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。

实验废弃物需按生物安全规范处理。

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