RNA 恒温快速扩增试剂盒（荧光型）

【产品名称】

通用名称：RNA 恒温快速扩增试剂盒（荧光型）-II

【包装规格】

货号：WLRE8208KIT

规格：48 份/盒

【原理概述】

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术：在常温恒温下，特殊修饰的反转录酶利用特异性引物 DNA 和模板 RNA 合成cDNA 链，反应体系中的重组酶、单链 DNA结合蛋白和 DNA 聚合酶以新合成的 cDNA链为模板进行快速核酸扩增反应。本试剂盒在 42 ºC 下，依赖核酸外切酶的作用，加入根据模板设计的特异的分子探针，使用荧光监测设备能实现对目标片段扩增过程的实时监控。适用于实验室级别的 RNA 扩增以及其他检测用途的 RNA 扩增使用。

【产品特点】

本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短（仅需 20 min）等优点，反应组分为干粉状态，操作简便，易于保存。

可适用于各种品牌的荧光定量 PCR 仪，恒温荧光扩增仪器等荧光检测设备。

【引物设计】

建议使用长度在 30-35 bp 的引物，引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度；引物设计避免形成二级结构而影响扩增；扩增子长度建议在 150-500 bp。

【荧光探针设计】

探针序列不与特异性引物识别位点重叠，长度为 46-52 nt，序列避免回文序列、内部二级结构和连续的重复碱基。探针共有四个修饰位点：距离 5’端的≈35 nt 的中部位置标记一个 dSpacer（四氢呋喃，THF），作为核酸外切酶的识别位点；THF 位点的上游标记一个荧光基团，下游标记一个粹灭基团，两个基团的间距为2-4 nt；THF 距离3’末端≥15 nt，并且 3’末端标记一个修饰基团，例如胺基、磷酸基团或 C3-Spacer。

【试剂盒组成】

注：考虑到核酸降解问题，RNA 系列产品不提供正对照模板和引物探针。

【注意事项】

1. 由于试剂盒灵敏度非常高，在进行反应时请注意避免核酸污染，并设置空白对照；

2．使用时请取出实验所需的 MIRA 反应单元的数量，剩余部分请置于存储条件下。