梅恩君病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 新品

产品概述

本试剂盒采用SYBR Green I染料法荧光定量技术，专为梅恩君病毒（Mayne virus）RNA检测设计，整合反转录（RT）与实时定量PCR（qPCR）于单管反应体系，实现高效、高灵敏度的核酸定量分析。适用于临床样本、环境监测及科研领域的病毒载量检测。

产品组分

2× Advanced SG Buffer：含优化缓冲液与SYBR Green I染料，支持单管RT-qPCR反应。

UH Enzyme Mix：耐热反转录酶（Hifair® V）与热启动Taq DNA聚合酶（UNICON® HotStart）预混，确保高扩增效率。

RNase-free H₂O：无核酸酶水，用于反应体系配制。

阳性对照：非传染性梅恩君病毒DNA片段（1×10⁸拷贝/μL），用于标准曲线制备与质控。

技术参数

灵敏度：可检测低至0.1 pg病毒RNA（高表达靶标）或1 pg（中等表达靶标）。

特异性：引物针对梅恩君病毒保守区设计，无交叉反应。

线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²–10⁷拷贝/μL）。

稳定性：预混液在4℃下可保存24小时，性能无显著变化。

操作流程

标准曲线制备：

将阳性对照按10倍梯度稀释（10²–10⁷拷贝/μL），独立操作以避免污染。

反应体系配制（20 μL/反应）：

10 μL 2× SG Buffer

0.5 μL UH Enzyme Mix

1 μL 模板RNA

8.5 μL RNase-free H₂O

程序设置：

反转录：50℃ 15分钟 → 预变性：95℃ 5分钟 → PCR扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环） → 熔解曲线分析。

注意事项

操作需在无核酸污染环境下进行，建议使用带滤芯枪头。

阳性对照仅用于实验质控，不可替代临床样本。

熔解曲线需呈现单一峰，以确认扩增特异性。

应用支持

兼容主流荧光定量PCR仪（含No Rox/Low Rox/High Rox平台）。

提供技术验证数据（如扩增效率≥90%，R²≥0.99）。

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