羊口疮病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 新品

产品基本信息

规格：50次/盒（20μL反应体系）

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

适用仪器：ABI系列、Bio-Rad、LightCycler、安捷伦MX3000P/3005P等荧光定量PCR仪。

检验原理

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量PCR技术，针对羊口疮病毒保守基因序列设计特异性引物，具有以下特点：

高灵敏度：检测下限可达100-500拷贝/反应。

高特异性：引物经优化，不与山羊疱疹病毒等其他病原体发生交叉反应。

即开即用：预混反应体系（含DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等），用户仅需提供待测DNA模板。

双重功能：支持定性和绝对定量分析（标准曲线线性范围覆盖5个数量级）。

试剂盒组成

2×qPCR MagicMix：预混PCR反应液（含SYBR Green染料）。

荧光PCR专用模板稀释液：用于标准品梯度稀释。

羊口疮病毒特异性引物混合液：靶向病毒保守区域。

阳性对照：无传染性DNA片段（1×10^7-10^8拷贝/μL）。

DNA病毒裂解液（试用装）：可选用于样本前处理。

使用手册：详细操作流程及注意事项。

自备试剂与耗材

待测样本DNA（需纯化至OD260/280≈1.8-2.0）。

无菌带滤芯枪头、PCR管、离心机、冰盒等。

部分机型需自备10×ROX校正染料（参照仪器说明书）。

使用方法

1. 标准曲线制备（以10倍梯度稀释为例）

标记6管，分别加入45μL稀释液，依次稀释阳性对照至10^6-10^1拷贝/μL。

每次稀释需更换枪头，避免交叉污染。

2. PCR反应体系配制

按20μL体系混合：10μL 2×MagicMix、2μL引物、2μL模板DNA、6μL无核酸酶水。

3. 上机程序

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循环，采集荧光信号）；

熔解曲线分析：验证扩增特异性。

注意事项

分区操作：试剂配制、样本处理、扩增需在独立区域进行，防止污染。

质量控制：每批实验需包含阴性对照（无模板对照）和阳性对照。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

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