腺热埃里希体染料法荧光定量PCR试剂盒

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板，无需额外配制主反应混合液。

高特异性：针对腺热埃里希体保守序列设计引物，与其他病原体无交叉反应。

高灵敏度：检测下限达100-几百拷贝/反应，适用于低浓度样本检测。

防污染设计：一管式闭管检测，避免扩增产物污染。

适用范围：仅限科研使用，不可用于临床诊断。

试剂盒组成

| 组分 | 规格/包装 | 功能说明 |

| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 预混PCR反应液（含酶、dNTPs） |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 样本稀释及阴性对照制备 |

| 腺热埃里希体PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） | 特异性扩增靶基因 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | 人工合成DNA标准品 |

| 使用手册 | 1份 | 操作流程及数据分析方法 |

注：需自备DNA模板及10×ROX（依机型需求）。

运输与保存

运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。

保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。

操作步骤

1. 阳性对照稀释（以10²~10⁷拷贝/μL梯度为例）

标记6管，分别加入45 μL稀释液，依次梯度稀释阳性对照（每次换枪头）。

稀释后冰上暂存，避免反复冻融。

2. PCR反应体系配置（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| 2×qPCR MagicMix | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA | 5 |

| 补水至 | 20 |

3. 扩增程序（参考）

预变性：95℃ 3分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析（依机型设置）。

数据分析

定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。

定性检测：Ct值≤35且熔解曲线单一峰判定为阳性。

注意事项

操作分区进行，避免交叉污染。

阳性对照需独立处理，严禁接触其他组分。

不同试剂盒组分可能略有差异，请以实际产品说明书为准。

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