紧密着色霉染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒基于SYBR Green I染料法，适用于RNA和DNA样本的一步法实时荧光定量检测。通过整合反转录与qPCR反应于单管体系，显著提升检测效率并降低污染风险。核心组件包括耐热反转录酶和热启动Taq DNA聚合酶，优化缓冲体系可实现高灵敏度检测（RNA低至0.1 pg，DNA达单拷贝）。

产品组分

2× Hifair® Advanced SG Buffer：预混反应缓冲液，含SYBR Green I染料。

Hifair® Advanced UH Enzyme Mix：耐热反转录酶与热启动Taq DNA聚合酶复合物。

RNase free H2O：无核酸酶水。

技术参数

灵敏度

RNA样本：高表达靶标0.1 pg，中等表达靶标1 pg；病毒RNA可检测至E2拷贝。

DNA样本：单拷贝基因检测。

重复性：低浓度样本90复孔CV值<5%。

精准度：可区分2倍浓度差异模板。

稳定性：预混体系4℃保存24小时性能无变化。

仪器兼容性：支持No Rox/Low Rox/High Rox平台，适配主流荧光定量PCR仪。

实验流程

反应体系配置：按比例混合缓冲液、酶混合物、引物及模板。

反应程序：

反转录：50℃ 15分钟（RNA样本）。

预变性：95℃ 30秒。

扩增循环：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环）。

熔解曲线分析（可选）。

注意事项

保存条件：-20℃长期保存，避免反复冻融；4℃短期稳定3个月。

仅限科研使用，不适用于临床诊断。

应用案例

细胞RNA检测：以293T细胞总RNA为模板，有效扩增不同GC含量靶标，熔解曲线单一。

质粒DNA检测：可精准定量低至个位数拷贝的质粒样本。

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